一、結構 1、柱管
超高壓色譜柱的柱管通常由高強度材料制成，這種材料的選擇是為了能夠承受遠高于傳統色譜柱的高操作壓力。柱管的內徑相對較小，較小的內徑有助于增加柱壓，在超高壓環境下實現快速分離。 較長的柱長可以提供更好的分離效果，但會增加分析時間。
2、填料
使用的填料顆粒非常小，甚至更小。常見的填料有硅膠及其化學改性材料。這些小顆粒能夠增加柱子的比表面積，提供更多的交互位點。
填料的表面性質多樣，有鍵合非極性基團、極性基團等不同類型的填料，以適應不同的分析需求。
3、篩板與端蓋
篩板位于柱兩端，是微孔濾網結構。它的作用是阻止填料顆粒隨流動相流出，同時允許流動相和樣品順利通過。
端蓋用于密封柱管兩端，防止污染物進入和流動相蒸發。端蓋與柱管之間通過螺帽連接，螺帽還能起到保持柱內壓力的作用。
二、工作原理
超高壓色譜柱基于樣品中的組分在流動相和固定相之間的分配系數不同而進行分離。當流動相攜帶樣品進入色譜柱后，由于柱內的固定相具有特殊的表面性質，樣品中的不同組分與固定相之間會發生相互作用。
在超高壓環境下，由于填充了小顆粒填料并且柱體能承受高壓，流動相可以高速通過色譜柱。在反相色譜柱中，流動相極性大于固定相極性，極性較弱的組分在流動相中的溶解度相對較大，分配系數較大，會更快地隨流動相流出柱子；而極性較強的組分與固定相的相互作用較強，分配系數較小，在柱內的保留時間更長。
柱內的壓力促使流動相快速流動，從而縮短了分離時間，并且小顆粒填料增加了柱子的表面積，使得樣品組分與固定相有更多的接觸機會，一方面加快了分離速度，另一方面也有助于提高分離的分辨率。同時，在離子交換色譜柱或手性分離色譜柱等特殊類型的超高壓色譜柱中，組分的離子性質或手性特征等也會影響它們與固定相的相互作用，從而實現特定類型的分離。
